中文题名: | 钙调蛋白磷酸酶B亚基多克隆抗体和单克隆抗体的制备与检测 |
姓名: | |
保密级别: | 公开 |
学科代码: | 071002 |
学科专业: | |
学生类型: | 学士 |
学位: | 理学学士 |
学位年度: | 2012 |
学校: | 北京师范大学 |
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第一导师姓名: | |
第一导师单位: | |
提交日期: | 2015-03-31 |
答辩日期: | 2012-05-16 |
中文关键词: | |
中文摘要: |
钙调蛋白磷酸酶B亚基(CNB)是钙调蛋白磷酸酶(CN)的调节亚基,正常生理状态下,CNB不仅存在于细胞内,也存在于胞外,如血清。本实验室之前对于CNB的药效药理做过一系列研究,发现CNB可以刺激小鼠的非特异性免疫功能,如巨噬细胞的增殖。重组人钙调蛋白磷酸酶B亚基(rhCnB)作为基因工程抗肿瘤新药已获得国内和美国的发明专利授权。为了研究CNB在血清中的生理作用,本实验室需要制备CNB抗体来封闭血清中的CNB。以实验室高纯度CNB免疫小鼠,以制备鼠源CNB多克隆抗体。同时,取小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞融合、筛选,制备鼠源CNB的单克隆抗体。最后用ELISA检测抗体效价,Western blotting则用于检测抗体特异性。免疫小鼠后,制备出鼠源CNB抗血清,ELISA检测血清中CNB抗体效价,得到了效价较高的抗血清。Western检测该血清中的CNB抗体具有明显的特异性。但是,取小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞融合后,没有筛选到可分泌CNB抗体的细胞株。本实验中,我们成功制得了高效价的多克隆抗体,但单克隆抗体的制备还有待进一步实验。
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馆藏号: | 本070402/1223 |
开放日期: | 2015-03-31 |