中文题名: | 枯草芽孢杆菌产生的抗真菌活性物质的结构及其作用机制的初步研究 |
姓名: | |
保密级别: | 公开 |
论文语种: | 中文 |
学科代码: | 071001 |
学科专业: | |
学生类型: | 学士 |
学位: | 理学学士 |
学位年度: | 2019 |
学校: | 北京师范大学 |
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第一导师姓名: | |
第一导师单位: | |
提交日期: | 2019-05-24 |
答辩日期: | 2019-05-15 |
中文关键词: | |
中文摘要: |
白色念珠菌是一种临床上常见的致病真菌,一般寄生在人的皮肤、口腔、肠道、咽喉、阴道黏膜和内脏等处,引起皮肤念珠菌病、粘膜念珠菌病、内脏及中枢神经念珠菌病、念珠菌疹乃至菌血症。随着抗真菌药物使用频率的增加,白色念珠菌的耐药性菌株不断增加,白色念珠菌感染所引起的相关疾病已经成为威胁人类健康的严重疾病,感染率和病死率日益增加,成为目前临床亟待解决的问题,真菌感染治疗面临着严峻的挑战。
本实验室从土壤中分离出的一株枯草芽孢杆菌G-61,经过发酵培养得到发酵上清液,其对白色念珠菌具有很好抑制作用,可以破坏酵母态白色念珠菌正常细胞形态并抑制酵母态细胞向菌丝态细胞转变,从而阻断了白色念珠菌的致病途径。该发酵上清液还具有良好的理化特性:耐高温,耐强酸强碱,对多种酶均不敏感等。此外,G-61产的发酵上清液具有广谱抑菌性,可以抑制革兰氏阴性菌、阳性菌和多种真菌,但其含有的活性物质的结构及其抑菌机制尚不清楚。
本实验对枯草芽孢杆菌G-61的发酵上清液中的抗真菌物质进行了粗提,经过酸沉淀、乙醇沉淀和甲醇浸取后,得到了粗提产物。并以金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌和乳酸杆菌这三种革兰氏阳性菌作为指示菌,比较粗提产物和达托霉素的抑菌效果。实验发现两者的抑菌效果基本相同,在一定浓度范围内,枯草芽孢杆菌G-61产抗菌物质的粗提产物的抑菌效果略强于达托霉素。可以推测枯草芽孢杆菌产抗菌物质抑制革兰氏阳性菌的作用机制可能与达托霉素的抑菌机制类似,通过作用于细菌的细胞膜,导致细胞膜去极化细胞内容物外泄,从而起到抑制细菌的效果。
对实验室现存的枯草芽孢杆菌G-61产抗真菌物质的最终纯化产物进行质谱检测后,计算其分子量为1759.2868,根据质谱图推测该分子可能含有易电离断裂的酯键或醚键。综合之前已有的包括H谱,碳谱及HSQC、HMBC在内的NMR结果,同时结合粗提和分离纯化过程中的极性、溶解性等性质,可以推测该活性成分可能含有短脂肪链、糖苷及肽键等元素。后续需要进一步的纯化工作,再进行结构鉴定和分析,才能得到准确的结构和元素组成。
枯草芽孢杆菌G-61产生的活性物质具有潜在药用价值,很可能成为一种新型、高效、低毒性的抗白色念珠菌药物。针对该活性物质的具体结构分析与鉴定及其具体作用机理的研究,对于发现新的抗真菌药物,发现新的作用机制与靶点等都具有重要意义。
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参考文献总数: | 16 |
馆藏号: | 本071001/19005 |
开放日期: | 2020-07-09 |