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中文题名:

 CRISPR/Cas9 系统构建人类乳腺癌内源雌激素受体α标签敲入细胞    

姓名:

 孟繁宇    

保密级别:

 公开    

论文语种:

 chi    

学科代码:

 071001    

学科专业:

 生物科学    

学生类型:

 学士    

学位:

 理学学士    

学位年度:

 2023    

校区:

 北京校区培养    

学院:

 生命科学学院    

第一导师姓名:

 王彦英    

第一导师单位:

 生命科学学院    

第二导师姓名:

 韩霆    

提交日期:

 2023-06-13    

答辩日期:

 2023-05-17    

外文题名:

 CRISPR/Cas9 system constructs human breast cancer Endogenous estrogen receptor alpha tag knock-in cells    

中文关键词:

 雌激素受体 ; 雌激素受体α ; 乳腺癌 ; CRISPR/Cas9 系统基因 修饰 ; 蛋白相互作用    

外文关键词:

 Estrogen receptor ; estrogen receptor alpha ; breast cancer ; CRISPR/Cas9 system gene modification ; protein interaction    

中文摘要:

雌激素受体是细胞核受体之一,在多组织中存在多种表达形式,参与雌激素调控基因特异性表达的生理过程。雌激素受体阳性乳腺癌占比高达所有乳腺癌亚型的 70%。雌激素受体α是雌激素受体两大主要的亚型之一,促进了乳腺癌的发生和雌激素受体阳性乳腺癌的发展。探究雌激素受体α互作蛋白的种类、结构、功能和作用方式,对于深入理解雌激素受体α与互作蛋白的效应,包括受体自身的合成、降解、定位、修饰、信号通路激活等机制,与受体对互作蛋白的生物学功能调控机制,具有重要的参考意义与应用价值。
本研究通过 CRISPR/Cas9 系统,在人类雌激素受体阳性乳腺癌细胞系 MCF7内源编码 ERα的基因 ESR1 N 端敲入标签序列,构建不同 tag-ESR1 MCF7 细胞系。这些细胞系可进一步应用于免疫沉淀-质谱联用、亚细胞共定位、免疫共沉淀等技术,为研究内源雌激素受体α互作蛋白提供了基础的细胞实验材料。

外文摘要:

Estrogen receptor is one of the nuclear receptors. It has multiple expression forms in different tissues, which participates in the physiological process of estrogen-regulated gene-specific expression. Estrogen receptor-positive breastcancer accounts for up to 70% of all breast cancer subtypes. Estrogen receptor α, one of the two main subtypes of estrogen receptors, promotes the occurrence of breast cancer and the development of estrogen receptor-positive breast cancer. Exploring the type, structure, function and mode of action of estrogen receptor α -interacting proteins gives an insight into the effects of estrogen receptor α and interacting proteins, including the mechanism of receptor, itself, synthesis, degradation, localization, modification, signal pathways activation and regulation mechanism of receptor-interacting proteins. The study is significant and has application value . In this study, Using the CRISPR/Cas9 system, a tag sequence is knocked into the N-terminal of the endogenous gene ESR1, which encodes estrogen receptor α, in the human estrogen receptor-positive breast cancer cell line MCF7 to construct different tag-ESR1 MCF7 cell lines. These cell lines can be further applied to techniques such as Immunoprecipitation-Mass Spectrometry,  subcellular co-localization, and Co-Immunoprecipitation, providing basic cell experimental materials for the study of endogenous estrogen receptor α -interacting proteins.

参考文献总数:

 91    

馆藏号:

 本071001/23029    

开放日期:

 2024-06-12    

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