结合固相萃取(SPE)和高效液相色谱(HPLC)，建立了磺胺胍、磺胺、磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶和磺胺间甲氧嘧啶5种磺胺类抗生素的分析方法。样品采用乙腈：Na2EDTA-McIlvaine缓冲溶液=1：1(v/v)为提取剂，再经过超声提取10min，固相萃取净化，固相萃取小柱为SAX-Oasis HLB串联，洗脱剂为3ml甲醇，用荧光胺进行柱前衍生化后进行液相色谱荧光检测，色谱柱为Inertsil ODS-3 C18 (5µm, 250×4.6mm)，以乙腈：2%醋酸=60：40(v/v)为流动相等度洗脱，流速1ml/min。荧光检测发射波长405nm，激发波长495nm。结果表明，本方法的检出限为0.04 ~ 0.14 μg/l，标准曲线线性相关系数(R2)大于 0.99，加标回收率为68.48~81.97%，相对标准偏差(n=4)小于15%。该方法简单、快速、灵敏，可以用于环境样品的检测分析，为进一步的研究做了铺垫。